ჩვენს ირგვლივ ბევრი უხსენებელი გმირია, რომლებიც თითქოს ჩვეულებრივები არიან, სინამდვილეში კი ჩუმად ბევრს გვიწყობენ ხელს.პროტეინაზა K არის "გამოუცნობი გმირი" მოლეკულური დიაგნოსტიკის ინდუსტრიაში, თუმცა ინდუსტრიაში "დიდ და ძლიერთან" შედარებით, პროტეინაზა K იმდენად დაბალია, რომ ჩვენ დიდი ხანია შეუმჩნეველი გვაქვს მისი მნიშვნელობა.ახალი გვირგვინის ეპიდემიის გავრცელებით, მოთხოვნა პროტეინაზა K-ზე გაიზარდა და მიწოდება სახლში და მის ფარგლებს გარეთ ბევრად ჩამორჩება მოხმარებას და ყველამ მოულოდნელად გააცნობიერა, რომ პროტეინაზა K იმდენად მნიშვნელოვანია.
რა არის პროტეინაზა K-ს გამოყენება?
პროტეინაზა K არის სერინის პროტეაზა პროტეოლიზური ფერმენტის აქტივობით და შეუძლია შეინარჩუნოს აქტივობა გარემოს ფართო სპექტრში (pH (4-12,5), მარილიანი ბუფერი, მაღალი ტემპერატურა 70°C და ა.შ.).გარდა ამისა, პროტეინაზა K-ს აქტივობა არ თრგუნავს SDS, შარდოვანა, EDTA, გუანიდინის ჰიდროქლორიდი, გუანიდინის იზოთიოციანატი და ა. ), საკვები (ხორცის დარბილება), ტყავი (თმის დარბილება), მეღვინეობა (ალკოჰოლის გამწმენდი), ამინომჟავების მომზადება (დაშლილი ბუმბული), ნუკლეინის მჟავა ექსტრაქცია, ადგილზე ჰიბრიდიზაცია და ა.შ., პროტეინაზა K არსებობს აპლიკაციები.ყველაზე ხშირად გამოყენებული პროგრამაა ნუკლეინის მჟავის ექსტრაქცია.
პროტეინაზა K-ს შეუძლია ნიმუშში არსებული ყველა სახის ცილის ენზიმოლიზება, მათ შორის იმ ჰისტონების, რომლებიც მჭიდროდ არის შეკრული ნუკლეინის მჟავებთან, ისე, რომ ნუკლეინის მჟავები გამოიყოფა ნიმუშიდან და გამოიყოფა ექსტრაქტში, რაც ხელს უწყობს ექსტრაქციისა და გაწმენდის შემდეგ საფეხურს.ვირუსული ნუკლეინის მჟავის გამოვლენისას, პროტეინაზა K არის ერთ-ერთი მნიშვნელოვანი კომპონენტი ვირუსის ნიმუშის ხსნარში.პროტეინაზა K-ს შეუძლია დაარღვიოს და გაააქტიუროს ვირუსის გარსის ცილა, რაც უფრო უსაფრთხოა ტრანსპორტირებისა და გამოვლენის ეტაპზე;გარდა ამისა, პროტეინაზა K-ს შეუძლია ასევე დაქვეითდეს RNase, რომელიც ხელს უშლის ვირუსული რნმ-ის დეგრადაციას და ხელს უწყობს ნუკლეინის მჟავას გამოვლენას.
პროტეინაზა K-ის ერთღამიანი პოპულარობა
იქნება ეს სამეცნიერო კვლევის სფეროში თუ IVD სფეროში, ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქცია არის ყველაზე ძირითადი ექსპერიმენტი, ამიტომ პროტეინაზა K ყოველთვის იყო ძალიან მნიშვნელოვანი არსებობა.თუმცა, წარსულში, პროტეინაზა K ბევრად ნაკლებად ცნობილი იყო, ვიდრე მისი როლი.ამის დიდი ნაწილი იყო იმის გამო, რომ პროტეინაზა K-ს მიწოდებისა და მოთხოვნის ურთიერთობა ძალიან სტაბილური იყო.რამდენიმე ადამიანი იფიქრებს, რომ პროტეინაზა K-ს მიწოდება პრობლემას წარმოადგენდა.
ახალი გვირგვინის ეპიდემიის გავრცელებით, გაიზარდა მოთხოვნა ნუკლეინის მჟავას ტესტირებაზე.2020 წლის ივნისის ბოლოსთვის, ჩინეთმა დაასრულა თითქმის 90 მილიონი ახალი გვირგვინის ტესტი და ეს რიცხვი კიდევ უფრო საგანგაშოა გლობალური მასშტაბით.ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქციის ექსპერიმენტებში პროტეინაზა K-ის სამუშაო კონცენტრაცია შეადგენს დაახლოებით 50-200 მკგ/მლ.საერთოდ, ნუკლეინის მჟავის ნიმუშის ამოღებას დაახლოებით 100 მკგ პროტეინაზა K სჭირდება.რეალურ გამოყენებაში, ნუკლეინის მჟავის ექსტრაქციის ეფექტურობის გაზრდის მიზნით, ხშირად პროტეინაზა K გამოიყენება გაზრდილი რაოდენობით.ახალი კორონავირუსის ნუკლეინის მჟავას გამოვლენამ მოითხოვა დიდი რაოდენობით პროტეინაზა K-ზე.პროტეინაზა K-ს მიწოდებისა და მოთხოვნის თავდაპირველი ბალანსი სწრაფად დაირღვა და პროტეინაზა K გახდა მნიშვნელოვანი ეპიდემიის პრევენციის მასალა ღამით.
პროტეინაზა K-ს გამომუშავების სირთულეები
მიუხედავად იმისა, რომ ეპიდემიის განვითარებასთან ერთად ხალხმა შეაფასა K პროტეინაზას მნიშვნელოვანი მნიშვნელობა, უხერხულია, რომ პროტეინაზა K-ს გადაჭარბებული დაბალი დონის გამო, რამდენიმე ადგილობრივი კომპანია იყო ჩართული პროტეინაზა K-ს წარმოებაში. პროტეინაზა K-ს წარმოების დამყარება წარმოების პროცესში აღმოჩნდა, რომ პროტეინაზა K არის უკიდურესად განსაკუთრებული ცილა.უკიდურესად რთულია პროტეინაზა K-ის წარმოების შესაძლებლობების გაფართოება მოკლე დროში.
პროტეინაზა K-ს ფართომასშტაბიანი წარმოება შემდეგი სირთულეების წინაშე დგას
1. დაბალი გამოხატულება
პროტეინაზა K-ს შეუძლია არასპეციფიკურად დაშალოს ცილების უმეტესობა და გამოიწვიოს სერიოზული ტოქსიკურობა ექსპრესიულ მასპინძელ უჯრედზე.ამიტომ, პროტეინაზა K-ს გამოხატვის დონე ზოგადად ძალიან დაბალია.გამოხატვის სისტემებისა და შტამების სკრინინგს, რომლებიც ძლიერ გამოხატავენ K პროტეინაზას, ჩვეულებრივ, უფრო ხანგრძლივ ციკლს მოითხოვს.
2. პიგმენტების და ნუკლეინის მჟავების ნარჩენები
ფართომასშტაბიანი დუღილი წარმოქმნის დიდი რაოდენობით პიგმენტს და მასპინძლის ნუკლეინის მჟავას ნარჩენებს.ძნელია ამ მინარევების ამოღება მარტივი გამწმენდი პროცესით, ხოლო კომპლექსური გაწმენდა ზრდის ღირებულებას და ამცირებს აღდგენის მაჩვენებელს.
3. არასტაბილურობა
პროტეინაზა K არ არის საკმარისად სტაბილური, მას შეუძლია თავად ფერმენტირება მოახდინოს და ძნელია მისი სტაბილურად შენახვა 37°C-ზე დიდი ხნის განმავლობაში დამცავი აგენტის გარეშე.
4. ადვილად დასალექი
პროტეინაზა K-ს ყინვაში გამხმარი ფხვნილის მომზადებისას, იმისთვის, რომ ყინვაში გამომშრალ ფხვნილში K პროტეინაზას მყარი შემცველობა დიდი იყოს, საჭიროა ყინვაში გამხმარი დამცავი აგენტის დამატება მაღალი კონცენტრაციით, მაგრამ როდესაც პროტეინაზა K-ის კონცენტრაცია აღწევს 20 მგ/მლ და ზემოთ, ადვილია აგრეგაცია წარმოქმნის ნალექს, რაც დიდ სირთულეებს უქმნის მაღალი მყარი შემცველობის მქონე პროტეინაზა K-ის ყინვაში გაშრობას.
5. დიდი ინვესტიცია
პროტეინაზა K-ს აქვს პროტეაზას ძლიერი აქტივობა და შეუძლია სხვა პროტეაზების ჰიდროლიზირება ლაბორატორიაში.ამიტომ, პროტეინაზა K მოითხოვს სპეციალიზებულ საწარმოო უბნებს, აღჭურვილობას და პერსონალს კვლევისა და განვითარებისა და წარმოებისთვის.
XD BIOCHEM-ის პროტეინაზა K ხსნარი
XD BIOCHEM-ს აქვს მომწიფებული ცილის გამოხატვისა და გამწმენდი პლატფორმა და აქვს მდიდარი გამოცდილება რეკომბინანტული ცილების გამოხატვისა და გაწმენდისა და წარმოების პროცესების ოპტიმიზაციის საქმეში.კვლევისა და განვითარების ჯგუფის სწრაფი ფორმირებით, პროტეინაზა K-ს ფართომასშტაბიანი წარმოების პროცესი დაძლეულია.ყინვაში გამხმარი ფხვნილის ყოველთვიური გამომუშავება 30 კგ-ზე მეტია.პროდუქტს აქვს სტაბილური მოქმედება, მაღალი ფერმენტის სპეციფიკური აქტივობა და არ აქვს მასპინძელი ციტოქრომის და ნუკლეინის მჟავის ნარჩენები.კეთილი იყოს თქვენი მობრძანება XD BIOCHEM-თან დასაკავშირებლად. მიიღეთ საცდელი პაკეტი (ელ.ფოსტა:sales@xdbiochem.comტელ: +86 513 81163739).
XD BIOCHEM-ის ტექნიკური გადაწყვეტილებები მოიცავს
მრავალ ასლი პლაზმური ინტეგრაციის გამოყენებით შეირჩევა მაღალი ექსპრესიის შტამები 8გ/ლ ექსპრესიის დონით, რაც გადალახავს პროტეინაზა K-ს დაბალი ექსპრესიის დონის პრობლემას.
მრავალსაფეხურიანი გაწმენდის პროცესის დამკვიდრების მეშვეობით, მასპინძელი ციტოქრომი და პროტეინაზა K ნუკლეინის მჟავის ნარჩენები წარმატებით იქნა ამოღებული სტანდარტული მნიშვნელობის ქვემოთ.
დამცავი ბუფერული ფორმულირებების მაღალი გამტარუნარიანობის სკრინინგის მეშვეობით შეირჩა ბუფერი, რომელსაც შეუძლია სტაბილურად შეინახოს პროტეინაზა K 37°C ტემპერატურაზე.
სკრინინგის ბუფერები გადალახავს პრობლემას, რომ პროტეინაზა K ადვილად გროვდება და გროვდება მაღალ კონცენტრაციებში, და საფუძველს უყრის პროტეინაზა K-ის მაღალი მყარი შემცველობის გაყინვის გამოშრობას.
XD BIOCHEM პროტეინაზა K ნიმუში
XD BIOCHEM პროტეინაზა K სტაბილურობის ტესტი: არ იქნება მნიშვნელოვანი ცვლილება აქტივობაში 80 დღის შემდეგ ოთახის ტემპერატურაზე
XD BIOCHEM პროტეინაზა K სტაბილურობის ტესტი: არ იქნება მნიშვნელოვანი ცვლილება აქტივობაში 80 დღის შემდეგ ოთახის ტემპერატურაზე.
XD BIOCHEM პროტეინაზა K-ისა და კონკურენტი პროდუქტების ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქციის ეფექტის შედარება.ნუკლეინის მჟავის ექსტრაქციის პროცესში გამოიყენება XD BIOCHEM და კონკურენტული პროტეინაზა K.XD BIOCHEM პროტეინაზა K-ს ექსტრაქციის ეფექტურობა უფრო მაღალია, ხოლო სამიზნე გენის Ct მნიშვნელობა დაბალია.
გამოქვეყნების დრო: დეკ-31-2021