4-ნიტროფენილ ბეტა-D-გალაქტოპირანოზიდი CAS:200422-18-0

ეფექტი: ONPG არის სუბსტრატი, რომელიც სპეციალურად გამოიყენება ფერმენტ β-გალაქტოზიდაზას არსებობისა და აქტივობის გამოსავლენად.როდესაც β-გალაქტოზიდაზა ფერმენტი არის და აქტიური, ის ყოფს ONPG-ს ორ პროდუქტად: ო-ნიტროფენოლად და გალაქტოზის წარმოებულად.ო-ნიტროფენოლის გამოთავისუფლება იწვევს ყვითელი ფერის ცვლილებას, რომლის გაზომვა შესაძლებელია სპექტროფოტომეტრის გამოყენებით.

განაცხადი: ONPG-ს აქვს რამდენიმე პროგრამა მოლეკულურ ბიოლოგიასა და ბიოქიმიის კვლევაში:

β-გალაქტოზიდაზას აქტივობის განსაზღვრა: ONPG ჩვეულებრივ გამოიყენება β-გალაქტოზიდაზას ფერმენტის აქტივობის გასაზომად და რაოდენობრივად.ო-ნიტროფენოლის წარმოქმნის სიჩქარე, რომელიც პირდაპირპროპორციულია ფერმენტის აქტივობისა, შეიძლება გაიზომოს სპექტროფოტომეტრიულად.

გენის გამოხატვა და რეგულაცია: ONPG ხშირად გამოიყენება ექსპერიმენტებში, რომლებიც დაკავშირებულია გენის ექსპრესიასთან და რეგულირების კვლევებთან.ის ხშირად გამოიყენება შერწყმა ცილების ანალიზებში, როგორიცაა ჩვეულებრივ გამოყენებული lacZ fusion სისტემა, გენების ექსპრესიის შესასწავლად სპეციფიკური პრომოტორების კონტროლის ქვეშ.ბეტა-გალაქტოზიდაზას აქტივობა, რომელიც იზომება ONPG-ის გამოყენებით, გვაწვდის ინფორმაციას გენის ექსპრესიის დონეზე.

β-გალაქტოზიდაზას აქტივობის სკრინინგი: ONPG შეიძლება გამოყენებულ იქნას, როგორც კოლორიმეტრული სკრინინგის მეთოდი რეკომბინანტული დნმ-ის ტექნოლოგიაში, რათა დადგინდეს LacZ გენის არსებობა და ფუნქციონირება, რომელიც აკოდირებს β-გალაქტოზიდაზას.სკრინინგის ეს მეთოდი გვეხმარება კლონების იდენტიფიცირებაში, რომლებიც შეიცავს ინტერესის გენს.

ფერმენტების კინეტიკური კვლევები: ONPG ასევე სასარგებლოა β-გალაქტოზიდაზას ფერმენტის კინეტიკის შესასწავლად.სუბსტრატის სხვადასხვა კონცენტრაციაზე ფერმენტ-სუბსტრატის რეაქციის სიჩქარის გაზომვით, შესაძლებელია განისაზღვროს კინეტიკური პარამეტრები, როგორიცაა მაიკლის-მენტენის მუდმივები (კმ) და რეაქციის მაქსიმალური სიჩქარე (Vmax).